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    如何构建稳定的视网膜缺血再灌注模型？这份技术指南请收好

    发布时间：2026-04-02

    从一根针、一瓶盐水，如何

    “重现”临床危机？


    在眼科疾病中，视网膜缺血再灌注损伤（RIRI）是一个绕不开的关键词。该损伤主要发生于视网膜中央动脉栓塞、急性闭角型青光眼等因视网膜血流中断所致的缺血性眼病。

    构建稳定、可重复的动物模型是研究视网膜缺血再灌注损伤的关键。今天，我们带您走进实验室，全景呈现大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型的构建与应用。



    为什么选择大鼠RIRI模型

    在众多眼科疾病模型中，前房加压法构建的大鼠RIRI模型被公认为“金标准”之一。它的优势非常直观：

    • 解剖高度相似：大鼠眼部结构与人类极为接近，视网膜层次清晰，便于观察与量化

    • 损伤程度可控：顺利获得调节灌注压力与时间，可精准模拟轻、中、重度损伤

    • 重复性极佳：适合药物筛选、机制验证及转化研究

    • 评价体系完整：从组织病理到分子机制，多维度验证模型可靠性

    如果你正在研究青光眼、缺血性视网膜病变，或开发相关治疗药物，这个模型你大概率绕不开。





    模型构建：显微“点睛”，重现危机

    现在最经典、应用最广的RIRI模型构建方法是前房加压法。整个过程看似简单，却步步关键。


    01

    实验动物

    品系：SD大鼠

    特点：眼部结构与人类高度相似，视网膜层次清晰。


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    02


    核心装置

    • 无菌针头 + 输液管 + 生理盐水瓶

    • 眼压控制：110 mmHg（精确控制是模型稳定的前提）

    (1mm Hg=0.133 kPa)。

    03


    手术流程

    步骤

    操作要点

    麻醉固定

    腹腔注射麻醉，侧卧位，适当牵拉眼周皮肤以暴露眼球，避免过度压迫

    穿刺入前房

    显微齿镊牵引，针头沿角膜缘刺入约1.5mm

    加压灌注

    打开输液开关，维持灌注1小时，每30秒滴加氯霉素滴眼液保护角膜，保持湿润

    再灌注

    关闭开关，缓慢拔针，待房水流出、虹膜复位，观察眼球张力恢复正常

    取材

    再灌注后适当时间安乐死，取眼球固定于固定液中



    03


    模型成功标志

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    造模前，视网膜红润

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    造模中（缺血期）：视网膜由粉色转为苍白

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    造模24h后（再灌注期）：血流恢复，颜色

    回转为正常

    小提示：缺血期视网膜颜色变白是判断加压是否成功的最直观指标，不可忽略。





    模型评价：四个维度，层层验证

    一个模型“稳不稳”，不能只看眼睛颜色，更需要从结构、分子、功能等多层面验证。

    01

    HE染色——从结构看损伤

    ◆

    对照组大鼠视网膜结构正常，各层细胞排列整齐，未见水肿或萎缩。

    ◆

    模型组造模7天后大鼠视网膜结构相对紊乱，视网膜萎缩变薄，神经节细胞层细胞减少，其中神经节细胞层、内丛状层（IPL）及内核层（INL）的变薄尤为显著。

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    数据来源：10.1186/s12967-024-05260-1                                                               

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    数据来源：10.1016/j.biopha.2017.06.050                                                                   

    02

    氧化应激指标—捕捉“损伤风暴”

    指标

    模型组变化

    意义

    SOD

    ↓

    抗氧化能力下降

    GSH-Px

    ↓

    自由基清除减弱

    CAT

    ↓

    过氧化氢清除受损

    MDA

    ↑

    脂质过氧化加剧


    03

    炎症因子—追踪“瀑布级联”

    ELISA检测显示，模型组血清中：



    ◉

    促炎因子：IL-1β、IL-6、TNF-α 显著升高。

    ◉

    抗炎因子：IL-10 显著降低

    04


    关键蛋白—揭示深层机制

    免疫组化结果提示模型组视网膜中：

    • HIF-1α ↑ —— 缺氧信号激活

    • Caspase-3 ↑ —— 凋亡通路启动

    • VEGF ↑ —— 新生血管形成倾向

    • NF-κB p65 ↑ —— 炎症核心枢纽激活

    这四个指标，基本覆盖了缺血再灌注损伤的核心分子事件，也是后续药效评价的重要靶点。


    这一模型能帮你解决什么问题？

    如果你正在：

    • 探索中药或化药对视网膜缺血再灌注损伤的保护作用

    • 构建眼科疾病相关的机制研究平台

    • 为青光眼、视网膜静脉阻塞等疾病寻找新的治疗靶点

    • 准备投稿高水平期刊，需要稳定、可重复的动物数据

    大鼠RIRI模型，都是你绕不开的“基本功”。




    写在最后

    从一根针、一瓶盐水，到一套可重复、可量化的疾病模型，背后是对实验细节的极致把控。
    视网膜缺血再灌注模型，不只是基础研究的工具，更是连接实验室与临床转化的桥梁。

    如果你正在搭建眼科药效评价平台，或在研究中遇到模型稳定性问题，希望这份实操指南能帮你少走弯路。




    参考文献

    1. Chen Z, Qiu PY, Ma CG. Dexmedetomidine preconditioning protects against retinal ischemia/reperfusion injury and inhibits inflammation response via toll-like receptor 4 (TLR4) pathway. Biomed Pharmacother. 2017 Sep;93:1018-1024.

    2. Wu J, Zhang D, Liu H, Li J, Li T, Wu J, Zhang S. Neuroprotective effects of apigenin on retinal ganglion cells in ischemia/reperfusion: modulating mitochondrial dynamics in in vivo and in vitro models. J Transl Med. 2024 May 13;22(1):447.

    3. 王玉丽,林娟,李新,等.丹红化瘀口服液对视网膜缺血再灌注损伤大鼠视网膜中央静脉阻塞症的保护作用及机制研究[J].中草药,2022,53(06):1621-1627.

    4. 武苗,陈星,牛静芬,等.瑞马唑仑对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的作用及机制研究[J].实用临床医药杂志,2025,29(04):16-22.